염색체 절단 검사. Chromosome breakage study

[Chromosome Breakage study]

 

Clastogen (MMC & DEB)에 대한 sensitivity를 같은 성별의 정상대조군과 비교하는 검사 (10~100배 증가)

 

Cf) Clastogen이란?

Clastogen은 정상적인 DNA 합성 과정을 방해하거나 DNA 파손을 직접 유발하여 염색체의 결실, 삽입 또는 재배열을 유발하는 돌연변이 유발제입니다. 

 

1. Non-banding: Giemsa stain without trypsin (band 거의 안보임, karyotype 보다 많이 보는 게 중요)

   A. MMC (mitomycin-C); non-specific clastogen – 50 개

   B. DEB (diepoxybutane); Fanconi-specific clastogen – 50 개

 

2. G-banding – 10개 (for karyotyping)

   총 110개 분석함.

 

3. Radial(2점) / Major(2점) / Minor(1점)  

   A. Total breaks/total cells <1.0 → cut off 넘으면 breakage positive

   B. Total cell % with breaks <20%

   C. Total breaks/aberrant mitosis(break 가진 cell 개수) <5.0 → cut off 넘지만, A값이 0.5~1.0일 경우,

                                                                                                           mosaicism 의심하여 fibroblast 검사 권고

 

*** Summary of the results of MMC or DEB studies [Control: CC22-????]

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          No.of cells    Major     Minor     Radials     Breaks/cell (<1.0)

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Patient       100          2         8         0            0.12 (100개 중 12 breaks)

Control       100          0        10         0            0.10 (100개 중 10 breaks)

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* Control 이 < 1.0 인 것을 확인해야 검사가 잘 되었음을 확신할 수 있다.

 

Clastogen을 처리한 뒤, 절단된 염색체들입니다.

<Minor break> 1 break

- Chtg: chromatid gap (minimal misalignment)

- Chrg: chromosome gap

- Chtb: chromatid break (discontinuity)

- Chrg: chromosome break

- ACE (acentric chromosome); marker chromosome

 

<Major break> 2 breaks

- DIC: dicentric chromosome

- Ring chromosome

 

<Radial break> 2 breaks 로 간주

- Trirad: 팔이 3개인 덩어리

- Quadrad: 팔이 4개인 덩어리

- Complex: 한덩어리에 2가지 종류 이상의 break 가 존재할 때