검체 접수, 접종 및 배지

검체 접수, 접종에 대한 일반수칙

 

1.     검사실에 도착한 검체는 즉시 접수, 접종 시행을 원칙으로 한다.

        (혈액배양은 BacT/ALERT VIRTUO 배양장비 사용). 도착한 검체를 Job별로 분류한다.

2.     즉시 접종이 불가능할 경우, CSF, Genital tract 검체는 실온보관, 그 외 검체는 접종 전 냉장 보관한다.

        검체 채취 후, 24시간 이내에는 접종해야 한다.

        → Neisseria와 같은 낮은 온도에 취약한 미생물 동정 위해 실온보관.

3.     검체 접종은 Biological Safety Cabinet (BSC), Class II에서 실시한다.

     BSC class 1: Provides personnel and environmental protection but no product protection

     BSC class 2: Partial barrier barrier system relying on movement of air to provide protection

                           for personnel, environment, and product

 

4.     검체, 배지 또는 주변에 오염되지 않도록 무균조작 수칙에 따라 접종한다.

5.     Fluid → Sputum → Stool 등의 순서로 오염성이 강한 검체를 나중에 접종한다.

6.     Blood agar → Chocolate agar → MacConkey agar 등의 순서로 선택성이 강한 배지를 나중에 접종한다.

 

 

배지 종류

출처: Microbiologyinfo.com

Alphabetical order로 정리하였음.

선택 배지는 빨간색, 증균 배지는 파란색으로 표시함.

 

- Blood Agar Plate (BAP)

일반 호기성 세균의 기초 배지 (Non-selective). 특수한 성분을 요구하는 세균을 제외한 모든 세균이 잘 자란다.

- Brucella Agar (BRU)

혐기성 세균 배양을 위한 선택 배지

- Chocolate Agar (CHO)

일반적으로 사용되는 기초 배지 (Non-selective). Gonococcus, Meningococcus, Hemophilus 등 까다로운 균도 잘 자란다.

- Legionella Selective Agar (BCYE)

Legionella pneumophilia 검출용 선택 배지.

- MacConkey Agar (MAC)

Gram negative 세균에 대한 선택 배지. 유당 발효 여부에 따라 colony color가 달라서 유당 발효균을 감별할 수 있다.

- Mueller Hinton Broth / Agar / Blood Agar

미생물의 약제 감수성 검사(디스크 확산법, Etest)를 위해 사용한다.

세균을 바르고 약제 디스크를 놓아 배양하면 억제대가 생기는데, 그 사이즈를 읽어 감수성 여부를 판단한다.

배지의 두께가 4mm를 유지하도록 주의하여야 한다.

- PPLO Agar (Mycoplasma agar)

Mycoplasma 검출용 선택 배지.

- Sabroud Dextrose Agar (SDA)

Yeast, Mold form fungus 배양용으로, Candida 균종 배양에 유용하다.

배지의 산성 (pH 5.0) 때문에 세균 성장은 억제된다.

- Salmonella, Shigella Agar (SS)

Salmonella & Shigella 검출용 선택 배지.

- Skim milk

균주를 장기간 냉동 보관할 때 사용한다.

- Sorbitol MacConkey agar

Escherichia coli O157:H7 (출혈성 대장균, ETEC) 검출용 선택 배지.

O157 균주는 집락이 colorless하게 나타나는 반면, 다른 E.coli는 pink color로 보인다.

- Thiosulfate-Citrate-Bile-Sucrose Agar (TCBS) (초록색 배지)

Vibrio cholerae와 다른 enteropathogenic vibrio의 분리 배양용. V. cholerae를 분리하기 위한 선택 배지.

- Thioglycollate media

모든 세균 (Anaerobic, Microaerophilic, Aerobic)의 증균용 배지

멸균된 물질의 세균 존재 유무를 검출하기 위해서도 사용.

- Thayer-Martin agar (TM)

Neisseria에 대한 선택 배지. 임균 및 수막구균

- Triple Sugar Iron Agar (TSI), 사면 배지

Dextrose, lactose, sucrose 및 기타 성분의 혼합물로, 3가지 이당류를 발효하는 균들을 동정한다.

Gram negative bacilli의 탄수화물 발효와 H2S의 생성을 시험하는 배지.

특히, Salmonella typhi의 경우, butt (아랫층)가 검은색으로 염색되고 slant (사면)가 노란색으로 변한다.

- Yersinia Selective Agar (CIN agar)

Yersinia enterocolitica 검출용 선택 배지.

- VRE/CRE/MRSA 배지